时隔3年后，韩春雨发表最新科研成果论文

时隔3年，曾西北面对政府向外的韩风雪未公开了一项最新科学篇文章。近日，韩风雪在可不来时字网站BioRxiv上刊发了一篇关于基因序列编辑的新文章：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。文章共有5名创作者，分作为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，岗位单位仅为定州信息技术大学基因序列编辑深入研究中所心。其中所，韩风雪为通讯创作者。据了解，篇文章中所提到的CasE是Ⅰ-EHG CRISPR复合物的氘心成分，它通过相辅相成特定的茎环的区域实质上处理pre-crRNA，称为 CasE Binding S，亦称为CBS。CasE保守His20参与催化来时性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则失去了催化来时性，但仍然与其特异性紧密相辅相成。在该深入研究中所，通过将 split 发光与dCasE的N端和C-末端（ΔHis20）融入，紧密相辅相成了来时体RNA方法VN-dCasE-VC。该该系统仅在实际上靶RNA时才发出发光，从而增强信噪比。在来时肝细胞中所进行平面图形学的RNA，不需要特定的亚肝细胞分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T肝细胞中所的高水平传达和仅匀分布表明CasE和dCasE适合于来时肝细胞中所的RNA操作方法。为了测试CasE在脊椎动物肝细胞中所传达时到底具备强来时性，创作者紧密相辅相成了“关停”报告基因序列线粒体CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中所的GFP mRNA和CasE相辅相成位点（CBS）都是由。当CasE被导入该系统时，GFP传达水平急剧下降。同时，为了实质性测试CasE来时性，创作者还紧密相辅相成了“开启”报告基因序列线粒体RED-16×CBS-Lin28-C1，其中所CBS插入RED结构上基因序列的3′-UTR的区和Lin28的中下游。Lin28是RNA氘保留瞬时，在其3′-UTR中所具备lin28瞬时的RED结构上mRNA差不多不能译成成蛋白质质。CBS-CasE依赖限制性截断lin28瞬时并从氘拘押靶mRNA可用译成（平面图1E和平面图1F）。这些表明CasE可以相辅相成并大块脊椎动物肝细胞中所的CBS。另外，为了将dCasE-CBS相互作用设计到RNA该系统中所，创作者通过将split-FP5-7与dCasE蛋白质相辅相成。发现一个原版，即VN-dCasE-VC很难发出发光，这也许是由于不应该的折叠或不稳定的情况下，但是当与靶RNA（CBS）相辅相成时，可以在发光显微镜下清楚地猎捕发光瞬时，即使VN-dCasE-VC传达线粒体的转染浓度非常低。接下来，创作者使用VN-dCasE-VC该系统脊椎动物肝细胞中所过传达的β-染色质质（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC该系统在肝细胞质中所显示出强发光。此外还观察到，向靶mRNA加到更多CBS可强化瞬时，发光更清晰，因此，可以通过缩减CBS的数量来侦测低丰度的mRNA。总的来说，韩风雪小组发明了一种更进一步RNA方法，将其名为为VN-dCasE-VC，该该系统尽可能来时肝细胞中所没有背景的特定RNA，通过发光将其平面图形学。目前为止已有两种来时肝细胞RNA激光方法，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雪小组技术开发的dCasE该系统，激光效果由于MS2，而且，dCasE蛋白质的组分为22kDa，近高于Cas13a的130kDa，dCasE的小组分更快递送至肝肝细胞，因此更适合可用来时肝细胞的RNA。一位差不多韩风雪的人士谈及：“这篇文章是此前韩风雪岗位的依循，借以都是技术开发基因序列编辑方法。”不过，相比较的是，该深入研究目前为止刊发于可不来时字网站，未经过同行初审，对此，有科研人士说明，首发在未经同行初审的可不来时字上，是为了取得首发管理权。“韩风雪下一步还会投正式期刊的。”前述人士据信。不究竟此次更进一步科学篇文章到底会再度给韩风雪带来关心，2016年5年初，《自然环境—微生物应用》刊发韩风雪小组更进一步基因序列编辑应用NgAgo，被媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的情节原HG炒作而走红，此后半年，韩风雪更进一步及其所在大学陆续取得各类理应和大量经费资助，但亦有国内多名基因序列编辑层面科学家发帖发声称实验结果难以移位，声称实验结果的可信度。2017年8年初，《自然环境—微生物应用》刊发题为《是该数据好像的时候了》刊发文章，宣布弃守韩风雪小组于2016年5年初2日刊发在该期刊的篇文章。2018年9年初，定州信息技术大学发布公告，韩风雪小组不实际上主观造假。但依据有关法规，撤除韩风雪所取得的荣誉称号，终止韩风雪小组承担的科研并交还给支出。韩风雪小组回应称，实验设计实际上缺陷、深入研究流程实际上着不条理的问题。有业界人士表示：“这波之后，NgAgo这个深入研究方向在中所国认真得很慢。韩风雪他们的岗位开展痛快也尤其困难，连学生也没有新招。”