J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的数间充质特性

胶质母细胞膜瘤（GBM）是最常见和爆炸性的人脑恶性，其外观上在于广泛的内值得注意。尽管在在在多模式外科手术方面拿到了十分困难，但GBM患者的结果仍然令人失望。GBM以外一个细胞膜亚群，称为GBM干细胞膜（GSCs），不具自我新的版本活性和多向分化潜能以及起始能够。因此，迫切需要探究针对GSC的新的外科手术策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）单链包含19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体细胞膜的各种生理操作过程。日渐多的论据声称，ALDH1A3在癌症干细胞膜（CSCs）之前发挥出高活性，并影响这些细胞膜内的各种免疫学外观上。在GBM之前，已发现ALDH1A3作为持续之间充质（MES）GSC的自我新的版本和致瘤性的这两项分子可。然而，MES GSCs之前ALDH1A3心理因素的选择性仍然是神秘的。2019年4月末8日，南京医科大学第一附属医院王慧博制作团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，发现USP9X是一种确实的DUB，可恒定ALDH1A3多乙酰基化和稳定化。并且，USP9X是得出ALDH1A3hi MES GSCs掺入的这两项分子可，是MES GSCs自我新的版本和致瘤性所必需的。同时还指标了USP9X抑制对患者来源的MES GSC人族植入三维的潜在治果。为了确切ALDH1A3蛋白究竟被乙酰基 - 赖氨酸体种系统（UPS）中文翻译后操纵，分析医务人员首先用于放线菌酮（CHX）阻断蛋白质从头合成并HEK293T细胞膜和正常人六边形胶质细胞膜（NHAs）之前的ALDH1A3蛋白质准确度。无论如何，ALDH1A3在CHX检视的8不间断内日渐过氧化一物并几乎检测不到。此外，用赖氨酸体抑制剂MG-132检视细胞膜随之而来ALDH1A3蛋白准确度夙着增大。这些数据资料声称ALDH1A3通过UPS过氧化一物。接下来，分析医务人员借助深入研究都由ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并用于靶向HEK293T细胞膜之前的98DUB的siGENOMERTF月末刊少年进行RNAi抽样。该分析初始抽样深入研究了与ALDH1A3表达相关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞膜之前的ALDH1A3共表达时，发现只有USP9X必须与可抑制ALDH1A3直接化学键，从而暗示USP9X是操纵ALDH1A3可靠性的夙着候选一物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或甲醇失活的质体C1566A USP9X（在甲醇结构域的一个这两项丝氨酸之前携带点突变）转染到HEK293T细胞膜之前。 WT USP9X而非C1566A质体的表达以剂量依赖性模式增大ALDH1A3蛋白准确度，声称USP9X以依赖于其DUB活性的模式恒定ALDH1A3。胶质母细胞膜瘤（GBM）干细胞膜（GSC）的之间充质（MES）变异代表肿瘤细胞膜亚群，其因其高度侵扰性和对正因如此疗法的选择性而闻名。在在已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为持续GSC的MES外观上的这两项决定因素。然而，支持异常ALDH1A3表达的选择性仍然难以捉摸。在该分析之前，分析医务人员发现乙酰基选择性赖氨酸9X（USP9X）是MES GSC之前ALDH1A3的确实去乙酰基化酶。 USP9X与ALDH1A3化学键，交联并稳定化。此外，分析结果推断FACS分选的USP9Xhi细胞膜掺入不具高ALDH1A3活性和有效致瘤能够的MES GSC。USP9X的消耗夙着上调ALDH1A3，随之而来MES GSC的自我新的版本和致瘤能够的归因于，这可以通过ALDH1A3的异位表达得到不小程度的拯救。此外，分析医务人员还证明USP9X抑制剂WP1130抑止ALDH1A3过氧化一物并且在MES GSC引申的则会人族植入三维之前推断出夙着的外科手术消炎。另外，USP9X与高血压人GBM样品之前的ALDH1A3表达强烈相关，并且对于不具MES亚组的患者不具结节病经济效益。总的来说，分析结果揭示了USP9X作为ALDH1A3蛋白稳定化的这两项去乙酰基化酶和GSC定向外科手术的潜在靶点。重构应是：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019